型 號
產(chǎn)品時間2024-02-22
所屬分類小鼠原代細(xì)胞
報價2600
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠乳腺上皮細(xì)胞 | 貨號 | EY-XY3682 |
英文名稱 | Mammary Epithelial Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測:細(xì)胞角蛋白-8(CK-8)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:小鼠乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
小鼠乳腺上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,小鼠乳腺上皮細(xì)胞分離自乳腺組織;乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺,主要由腺上皮細(xì)胞組成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡;近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞(MEC)有密切聯(lián)系,體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織,乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長因子共同調(diào)控, |
1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團或單個細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈。
信號感應(yīng)增殖相關(guān)蛋白1抗體
發(fā)酵產(chǎn)物酶(glutaminase)活性比色法(405)定量檢測試劑盒
免疫組化AP-BCIP/NBT底物顯色試劑盒
大量(文庫)酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒
TRAIL 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
通用型諾瓦克病毒Norovirus基因檢測試劑盒
石蠟切片組織蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒-LEPTIN
動物細(xì)胞鈉/鉀ATP酶(Na+/K+ -ATPase)活性比色法
單線態(tài)氧氣清除(scavenging)活性比色法篩選試劑盒
石蠟切片總高氯酸萘醌(PAN)直接染色試劑盒
體液脯羥化酶(prolil hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒
冰凍切片組織CDK4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
糖果糖精比色法定量檢測試劑盒
非同位素AP-BCIP/NBT法DNA南方雜交印跡試劑盒
體液肌酸激酶同工酶腦型(CK--BB)活性比色法定量檢測試劑盒
動物血小板線粒體DNA萃取試劑盒
著絲粒蛋白抗體
桿菌PirA抗體
染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體
KIAA1609蛋白抗體
細(xì)胞色素B561結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
β-taxilin蛋白抗體
酪蛋白激酶受體A8抗體
小鼠乳腺上皮細(xì)胞A激酶錨定蛋白14抗體
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