型 號
產(chǎn)品時間2024-02-18
所屬分類其它細(xì)胞系
報價1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度,當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時,即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
豬脂肪干細(xì)胞(永生化)
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 豬脂肪干細(xì)胞(永生化) | 組織來源 | 實驗動物正常脂肪組織 |
種屬 | 豬 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 長梭狀細(xì)胞 |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
背景簡介;根據(jù)不同來源及分化階段,干細(xì)胞可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞具有分化為多種不同組織的能力,但在倫理上存在爭議。成體干細(xì)胞因其來源廣泛、增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn),現(xiàn)已成為組織工程學(xué)研究的種子細(xì)胞。其中,脂肪干細(xì)胞作為組織工程修復(fù)的種子細(xì)胞,因其具有來源豐富、取材容易、增殖能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),正受到越來越多的關(guān)注。脂肪干細(xì)胞形態(tài)類似成纖維細(xì)胞,具有較強(qiáng)的增殖能力。在一定的誘導(dǎo)條件下,可分化為脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、上皮細(xì)胞等,具有多向分化潛能。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。 細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測;HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性 培養(yǎng)基;豬脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實驗室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時,即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用??筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實驗完成。
(4)消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實驗進(jìn)度。
(5)細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀棄去上清后,應(yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)ELISA試劑盒 ,英文名: TPPP ELISA Kit
ELISAKit5-雞5核苷酸酶規(guī)格:48T/96T
Rat leukoiene C4 (LTC4) ELISA Kit 大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒
RatImmunoglobulinM,IgMELISAKit 大鼠M(IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforCTAPIII(Humanconnectivetissue-activatingpeptideIII,CTAPIII)ELISAKit人結(jié)締組織活化肽Ⅲ規(guī)格:48T/96T
HumanCoxsackievirusIgG,CoxV-IgGELISAKit人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人上皮細(xì)胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)免疫試劑盒 Mouse hepatitis B virus e aibody,HBeAb ELISA Kit
牛白血病病毒(BLV)檢測試劑盒(-PCR法) 48T
Humanprogesteronereceptor,PGRELISA試劑盒人孕同受體(PGR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人體組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitSc1-70-Ab人抗Sc1-70抗體規(guī)格:48T/96T
大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 ,英文名: ISR-β ELISA Kit
人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA檢測試劑盒Humanai-braiissueaibody,ABAbELISAKit 96T/48T
大鼠αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)免疫試劑盒 Rat α-glathione S-ansferases,α-GST ELISA Kit
中心體肌動蛋白γ1/增強(qiáng)型PI3K蛋白抗體
谷丙轉(zhuǎn)氨酶2抗體
溶質(zhì)載體家族25成員17抗體
MED28蛋白抗體
細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體
白介素14抗體
磷酸化CRK抗體
CD299抗體
豬脂肪干細(xì)胞(永生化)血管內(nèi)皮生長因子抗體
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