CW2人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kit 小鼠Ⅹ型膠原(COL10)ELISA試劑盒 SYK： 非受體型酪酸蛋白激酶抗體 CL-0059CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠ⅩⅤ型膠原(COL15)ELISA試劑盒 Synapsin 1： 神經(jīng)突觸素1抗體 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 (HIBEC)( 5×105 )

大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2 小鼠Ⅶ型膠原(COL7)ELISA試劑盒 Synapsin II： 神經(jīng)突觸素2抗體 小鼠畸胎瘤細(xì)胞;P19 小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 小鼠Ⅵ型膠原α1(COL6α1)ELISA試劑盒 Synapsin III： 神經(jīng)突觸素3抗體 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3

A549/DDP細(xì)胞，耐DDP肺癌細(xì)胞 中國倉鼠肺細(xì)胞,CHL細(xì)胞 CM-M002小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 小鼠Ⅴ型膠原α2(COL5α2)ELISA試劑盒 Synaptogyrin 1： 神經(jīng)細(xì)胞囊泡循環(huán)蛋白1抗體 ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MAP3K2： 原活化蛋白激酶激酶2抗體 CM-H126人小腦顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

IFNB1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠結(jié)合蛋3(IGFBP-3)ELISA試劑盒 COX IgG VI 柯薩奇病毒 IgG Ⅵ(間接法二步法)

GPR24： G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 INSR Others Human 人 Insulin Receptor / INSR / CD220 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠結(jié)合蛋1(IGFBP-1)ELISA試劑盒 RSV IgG 合胞病毒 IgG(間接法二步法)

MAPK organizer 1： 原活化蛋白激酶組織蛋白1抗體 HT-29, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 貂肺上皮細(xì)胞,Mv1Lu細(xì)胞 SW620 [SW-620](人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)

CW2人結(jié)腸癌細(xì)胞Histone H3 (mono methyl K79)： 單甲基組蛋白H3K9抗體 B3GALT5 Others Human 人 B3GALT5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

129小鼠胚胎干細(xì)胞 The 129 mouse embryonic stem cells 人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA 試劑盒 Telomerase (TE) 端粒酶(催化亞單位)(多肽抗原) 0.5mg

HDHD2B： HDHD2B蛋白抗體 盤羊皮膚細(xì)胞;OAM-S1 大鼠成肌細(xì)胞，L6細(xì)胞 TM4細(xì)胞，正常小鼠Leydig細(xì)胞

PROCR Others Human 人 Epcr / PROCR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人結(jié)蛋白(Des)ELISA 試劑盒 TGF-Alpha (Ttansforming Growth Factor –Alpha) 轉(zhuǎn)移生長因子–α(抗原) 0.5mg

HAX1： 造血干細(xì)胞特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體 CL-0348Hce-8693(人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化))5×106cells/瓶×2

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。