?技術(shù)原理:
產(chǎn)品僅用于科研DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
產(chǎn)品名稱:玉米內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)adhl基因探針法PCR試劑盒
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
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注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲(chǔ)存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
枯草芽孢桿菌深黑變種 種屬:BacillussubtilisVar.aterrimus(LehmannetNeumann)Smithetal. 模式菌株 no
塵埃芽孢桿菌 種屬:BacilluspulvifacieusKatznelson 模式菌株 no
日本根霉 種屬:RhizopusjaponicusVuillemin 模式菌株 no應(yīng)用領(lǐng)域 產(chǎn)乳酸和延胡索酸
側(cè)耳 種屬:Pleurotussp. 模式菌株 no應(yīng)用領(lǐng)域 食用
黃萎輪枝孢 種屬:Verticilliumalbo-atrumReinkeetBerthold 模式菌株 no應(yīng)用領(lǐng)域 病原菌
綠色木霉 種屬:Trichoderma viride Persoon : Fries安全等級(jí) 1模式菌株 no應(yīng)用領(lǐng)域 產(chǎn)纖維素酶
粉紅木霉 種屬:TrichodermaroseumHeffm 模式菌株 no
放射形根瘤菌 種屬:Rhizobium radiobacter (Beijerinck and van Delden) Young et a 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
間座殼 種屬:Diaporthe oncostoma (Duby) Fuckel 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
癤葡萄座腔菌 種屬:Botryosphaeria dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
淡色生赤殼菌 種屬:Bionectria ochroleuca (Schwein.) Schroers & Samuels 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
棲稻黃色單胞菌 種屬:Flavimonas oryzihabitans (Kodama et al.) Holmes et al. 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
蘇云金芽孢桿菌 種屬:Bacillus thuringiensis Berliner 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
藤黃紅球菌 種屬:Rhodococcus fascians (Tilford) Goodfellow 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
玉米內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)adhl基因探針法PCR試劑盒人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒總RNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HDF-n tRNA
人真皮成纖維細(xì)胞-總RNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HDF-a tRNA
人毛細(xì)胞總RNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HHDPC tRNA
人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞總RNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HHGMC tRNA
人外根殼細(xì)胞總RNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HHORSC tRNA
人內(nèi)根殼細(xì)胞總RNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HHIRSC tRNA
人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞總RNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HLEC tRNA
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