?技術(shù)原理:
產(chǎn)品僅用于科研DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
產(chǎn)品名稱:大麥內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)PKABA1基因染料法PCR試劑盒
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
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注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲(chǔ)存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
血鏈球菌 種屬:Streptococcussanguinis 分離基物 人類口腔,日本安全等級(jí) 1模式菌株 no
醋酸醋桿菌 種屬:Acetobacteraceti 分離基物 酒精醋安全等級(jí) 1模式菌株 yes
伊氏李斯特氏菌 種屬:Listeriaivanoviisubsp.ivanovii 分離基物 保加利亞羊安全等級(jí) 1模式菌株 yes
英諾克李斯特氏菌 種屬:Listeriainnocua 分離基物 牛腦安全等級(jí) 1模式菌株 yes
不動(dòng)桿菌 種屬:Acinetobactersp. 分離基物 好氧污泥安全等級(jí) 1模式菌株 no
食酸菌 種屬:Acidovoraxsp. 分離基物 飲用水管網(wǎng)生物膜安全等級(jí) 1模式菌株 no
短波單胞菌 種屬:Brevundimonassp. 分離基物 九龍江水源水安全等級(jí) 1模式菌株 no
長(zhǎng)根菇 種屬:Oudemansiella sp. 描述 菌蓋潔白小,菌柄堅(jiān)挺,嫩
洛巴伊口蘑(金福菇) 種屬:Tricholoma lobayense 描述 子實(shí)體小至中等大。菌蓋直徑3-12cm,半球形至近平展,中部稍凸起,濕潤(rùn)時(shí)粘,幼時(shí)白色、污白色,后期帶灰褐色或淺綠灰色,邊緣向內(nèi)卷且平滑。菌肉白色,傷處變橘紅色,稍厚。菌褶白色,傷處變紅,彎生,不等長(zhǎng),中等密至較密。菌柄長(zhǎng)5-12cm,粗1.2-2.5cm,白色,往往向下膨大近紡綞形,基部根狀,內(nèi)部松軟。孢子無(wú)色,光滑,橢圓形至近卵圓形,5.6-8(9.6)μm×3.8-5.3μm
桃紅側(cè)耳 種屬:Pleruotus salmoneostramineus 描述 子實(shí)體顏色較深
大斗菇(大革耳) 種屬:Lentinus giganteus 描述 菌蓋直徑5~12cm,可達(dá)20cm,扁平球形至稍平展,表面菱色、淺褐色、深褐色至深肉桂色,有深色鱗片,而邊緣往往鱗片色淺至污白色,以及有毛狀物或絮狀物。菌肉白色,稍厚或厚,細(xì)密。菌褶白色,密、彎生、不等長(zhǎng)。菌柄中生至偏生,白色,常彎曲,長(zhǎng)3~8cm,粗0.5~1.5cm,菌環(huán)以下有纖毛狀鱗片,內(nèi)實(shí)纖維質(zhì)。菌環(huán)易消失,白色。孢子印白色。孢子印無(wú)色,光滑,橢圓形至卵圓形,4.5~7μm×3~4μm。
多脂鱗傘(黃傘) 種屬:Phonliota adiposa 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
柱狀田頭菇(茶樹菇、楊樹菇) 種屬:Agrocybe cylindracea 描述 子實(shí)體小或中等大。菌蓋直徑2-9.5cm,半球形至扁平,中部稍突起,幼時(shí)深褐色至茶褐色,漸變淡褐色、淡灰褐色至淡土黃色,邊緣色淡,濕潤(rùn)時(shí)稍粘,光滑或往往中部多皺紋。菌肉污白色,中部較厚邊緣薄。菌褶污黃褐色至褐色,密,直生至近彎生,不等長(zhǎng)。菌柄長(zhǎng)3-9cm,粗0.4-1cm,污白色,向下漸呈淡褐色,具纖毛狀小鱗片,內(nèi)實(shí)至松軟,多彎曲和稍扭轉(zhuǎn)。菌環(huán)生柄上部,白色,膜質(zhì),上面具細(xì)條紋,往往布滿孢子而呈褐色。孢子印褐色。孢子淡黃褐色,光滑,橢圓形或?qū)挋E圓形至卵圓形,8-10.4μm×5.2-6.4μm。褶緣囊體近紡錘狀或棒狀, 頂部鈍, 與褶側(cè)囊體形態(tài)相似。
大杯傘 種屬:Clitocybe maxima 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
大麥內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)PKABA1基因染料法PCR試劑盒內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
中斷位點(diǎn)蛋白STIL抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
中腦核仁蛋白抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
中性鞘磷脂2抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶ELANE抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
Anti-KV1.5 KV1.5抗體(50 ul)
Anti-KV1.5 KV1.5抗體(0.2 ml)
Anti-KV1.5-ATTO-550 KV1.5-ATTO-550抗體(50 ul)
Anti-KV1.5 (extracellular) KV1.5 (胞外)抗體(50 ul)
Anti-KV1.5 (extracellular) KV1.5 (胞外)抗體(25 ul)
Anti-KV1.5 (extracellular) KV1.5 (胞外)抗體(0.2 ml)
Anti-KV1.4 KV1.4抗體(50 ul)
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