參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:瑞氏絳蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:Raillietina spp.PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?瑞氏絳蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢原理是由一對引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
D-甘露醇其他名稱: 甘露醇;甘露糖醇;已六醇;木密醇;D-甘露糖醇;甘露密醇;木蜜醇;D-甘露密醇;D-木蜜醇英文名稱: D-Mannitol其他名稱: 1,2,3,4,5,6-Hexanehexol;Diosmol;Manicol;Manita;Manna sugar產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%包裝:100克/500克CAS號:69-65-8
L-鼠李糖500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: L-鼠李糖其他名稱: 6-脫氧-L-甘露糖;甲基戊糖;L-異甜醇;L-(+)-鼠李糖;6-脫氧-L-苷露糖單水合物英文名稱: L(+)-Rhamnose monohydrate其他名稱: 6-Deoxy-L(+)-mannose產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98%
肌醇中文名稱: 肌醇其他名稱: 環(huán)己六醇;肌糖;環(huán)六甲醇;六羥基環(huán)己;環(huán)六甲醇;環(huán)己糖醇;六羥基環(huán)己醇;肉肌糖英文名稱: Inositol其他名稱: Myo-Inositol;1,2,3,4,5,6-Cyclohexanehexol;Hexahydroxycyclohexane產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包裝:25克/100克/500克
L-乳BR,98%,粉末1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: L-乳其他名稱: L-2-羥基丙;(S)-(+)-2-羥基丙;α-羥基丙;L(+)-乳;α-乳;肌乳英文名稱: L-(+)-Lactic acid其他英文名稱: (S)-(+)-2-Hydroxypropanoic acid;Sarcolactic acid
DL-乳英文名稱: DL-Lactic acid產(chǎn)品規(guī)格: CP,85%包裝:500毫升CAS號:50-21-5C3H6O3=90.08級別:CP
L-蘋果其他名稱: L-羥基琥珀;L-羥基丁二;(S)-羥基丁二;L-丁醇二英文名稱: L-Malic acid其他名稱: (-)-Malic acid ,L(-)-Hydroxysuccinic acid;L(-)-Hydroxybutanedioic acid;Apple acid產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包裝:100克/500克CAS號:97-67-6
DL-蘋果其他名稱: 蘋果;DL-羥基琥珀;DL-羥基丁二;外消旋體蘋果英文名稱: DL-Malic acid其他名稱: DL-Hydroxybutanedioic acid產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包裝:100克/500克CAS號:6915-15-7或617-48-1
二硫代蘇糖醇100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: 二硫代蘇糖醇其他名稱: 1,4-二硫蘇糖醇;DL-1,4-二硫代蘇糖醇;1,4-二巰基蘇糖醇;1,4-二巰基-DL-蘇糖醇;二巰基丁二醇;1,4-二硫代-DL-蘇丁醇英文名稱: DTT其他名稱: DL- Dithiothreitol;1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol;Threo-2,3-dihydroxy-1,4-dithiobutane;1,4-Dithiothreitol產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%
瑞氏絳蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢Anti-5-LOX 5-脂氧合酶 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) 磷酸化5-脂氧合酶 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) 磷酸化5-脂氧合酶 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-8-OHdG 8-羥基脫氧鳥苷 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-A2AR 腺苷A2A受體 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-AACT-Alpha1 α-1抗胰糜蛋白酶 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-AAK1 AP2關(guān)聯(lián)激酶1 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-AAT α-1抗胰蛋白酶 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-AATK AATK細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶 規(guī)格: 0.2ml *
注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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