參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:Madurella spp.PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒多少錢原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結合,兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
三十烷醇/1-三十烷醇/蜂花醇/正三十烷醇/三十醇/1-羥基三十烷/蜂花烷醇/Triacontanol試劑級,92%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,593-50-0RT
馬來酰肼/青鮮素/1,2-二氫-3,6-噠嗪二酮/順丁烯二酰肼/抑芽丹/本息/失水蘋果酰肼/二羥基噠嗪/Maleic Hydrazide高純,99%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,123-33-1RT
馬來酰肼鉀鹽/青鮮素鉀鹽/Maleic hydrazide potassium salt高純,99%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,689-82-7RT
二苯基羰酰二肼/二苯氨基脲/二苯卡巴肼/二苯基碳酰二肼/1,5-二苯羰酰肼/均二苯卡巴肼/對稱二苯基羰二肼/二苯偕肼/羰代雙苯肼/二苯碳酰二肼/對稱二苯氨基脲/1,5-二苯基卡巴肼/DiphenylcartazideAR25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,140-22-7RT,避光
甜菜堿鹽酸鹽/鹽酸甜菜堿/甘氨酸三內(nèi)鹽鹽酸鹽/*銨乙內(nèi)酯鹽酸鹽/Betaine HC1超純,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,590-46-5RT
無水甜菜堿/甜菜素/*銨乙內(nèi)酯/甘氨酸三內(nèi)鹽/*基甘氨酸/Betaine超純,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,107-43-7RT,避光
腺苷/腺嘌呤核苷/9-β-D-呋喃核糖基腺嘌呤/腺素苷/胰苷/腺呤配糖/腺尿環(huán)核苷/腺甙/Adenosine高純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,58-61-72~8℃,避光
5´-腺苷一磷酸/5´-腺苷酸/腺苷-5′-單磷酸/腺苷-5′-磷酸/5′-磷酸腺苷/5'-腺嘌呤核苷酸/5'-腺嘌呤核甙酸;5-單磷酸腺苷/5´-AMP高純,95%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,61-19-82~8℃
5-腺苷一磷酸二鈉鹽/腺苷-5′-單磷酸二鈉/5´-腺苷酸二鈉/5'-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽/5'-腺嘌呤核甙酸二鈉鹽/5-磷酸腺苷二鈉鹽/單磷酸腺苷二鈉/一磷酸腺苷二鈉/5'-AMP,2Na超純,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,4578-31-82~8℃
A250/A260=0.79~0.89
A250/A260=0.74~0.82
胞嘧啶/4-氨基-2-羥基嘧啶/細胞堿/細胞嘧啶/氧胞嘧啶/胞嗪/4-氨基-2(1H)嘧啶酮/Cytosine超純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,71-30-7RT
胞苷/胞嘧啶核苷/胞嘧啶核糖核苷/胞甙/4-氨基-1-β-D-呋喃核糖基-2-(1H)-嘧啶酮/Cytidine超純,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,65-46-3RT
5′- 胞苷單磷酸/5′- 胞苷酸/5'-單磷酸胞苷/5'-胞嘧啶核苷酸/5'-胞甙酸/5'-磷酸胞嘧啶核苷/胞苷-5’-單磷酸/胞苷-5′磷酸/胞苷-5'-一磷酸/5′- CMP高純,95%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,63-37-62~8℃
馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒多少錢O-TOLUENESULFONYL CHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Silicone SE-52 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細胞培養(yǎng)
2-Bromo-6-methoxypyridine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
METHYL LINOLENATE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分
Decyl alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分
4-Aminoantipyrine 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
DI-N-HEXYL SULFIDE 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
SILICONE OV-1 質(zhì)量規(guī)格:>97%
注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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