傘枝梨頭霉PCR試劑盒具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,可更大限度的減少人為誤差。使用時只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作過程中的污染,使用時只需取適量溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補足體積,使溶液濃度為1×即可進行反應(yīng)。使用前請保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù)PCR原理開發(fā)的試劑盒。具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性。
傘枝梨頭霉PCR試劑盒反應(yīng)的準備:
待各組份融化后先瞬時離心,然后輕彈混勻。按已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系,每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照,測試反應(yīng)管可以有多個。配制過程中應(yīng)注意無菌,戴口罩,并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風壓的設(shè)備如超凈臺或生物安全柜中進行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。
傘枝梨頭霉PCR試劑盒的使用方法:
注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,離心數(shù)秒后使用。
1、樣本處理
待檢樣本的核酸提取可采用PCR試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2、擴增試劑準備
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMDRT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMDRT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20μl至單個PCR反應(yīng)管)。