維生素CELISA試劑盒的準備:
1.使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫,試劑不能直接在37oC溶解。
2.標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,依次倍比稀釋成不同的梯度,標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3.濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
維生素CELISA試劑盒的樣本收集及儲存:
1.細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存,避免反復凍融。
2.血清樣本:
室溫血液自然凝固20min后,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存,保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。
3.血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合20min,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存,避免反復凍融。