產(chǎn)氣腸桿菌PCR試劑盒是簡(jiǎn)便的利用CTAB取大腸桿菌基因組DNA的試劑盒，其提取原理是利用蛋白酶K消化蛋白，CTAB沉淀多糖，再經(jīng)加熱使蛋白變性與DNA分離，乙醇沉淀核酸獲得基因組DNA，可進(jìn)行酶切、PCR等下游實(shí)驗(yàn)。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)氣腸桿菌PCR試劑盒的操作說(shuō)明：
1、本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌時(shí)可以不用*融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以*融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
2、為保證菌種純正，避免其它細(xì)菌污染，盡量先劃平板，然后再挑單克隆菌落進(jìn)行后續(xù)操作。
冷凍管開封：
用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉嚴(yán)格消毒冷凍管蓋。
菌株復(fù)溶：
無(wú)菌環(huán)境中旋開裝有復(fù)溶液的滴瓶蓋，吸取1ml左右復(fù)溶液，加入到冷凍管中。輕輕振蕩，使凍干菌株溶解呈懸浮狀。
菌株復(fù)壯：
用無(wú)菌吸管吸取菌懸液，轉(zhuǎn)移到復(fù)溶液滴瓶中。做好標(biāo)識(shí)，在適宜溫度下培養(yǎng)。細(xì)菌在30-‐35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-‐48h，真菌在23-‐28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-‐72h（必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間）。
菌株傳代：
將得到的菌株的新鮮培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到適宜的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基中（盡量增大接種量：如用無(wú)菌吸管吸取≥50μl新鮮培養(yǎng)物至固體培養(yǎng)基，邊移動(dòng)邊緩慢釋放），適宜溫度下培養(yǎng)，用以菌株的保藏、傳代及制備工作菌株。
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