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    ELISA常見10個問題

    點擊次數(shù):1075  更新時間:2015-11-25

    1. 產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格?可檢測多少個樣本?

        產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。ELISA試劑盒

        每次實驗的標(biāo)準(zhǔn)曲線一般設(shè)7個不同濃度,加上空白孔,標(biāo)準(zhǔn)曲線一共需要8個孔。因此,一個48T試劑盒zui多可以測定40個樣本(不做重復(fù)且一次用完),一個96T試劑盒zui多可以測定88個樣本(不做重復(fù)且一次用完)??梢愿鶕?jù)實際樣本數(shù)量和實驗計劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。

    2.48T和96T的試劑盒有哪些不同?

        48T和96T的試劑盒,每個孔的反應(yīng)體系都是*一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規(guī)格,詳見說明書。

    3. 產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何?

        產(chǎn)品在前期已通過嚴(yán)格的穩(wěn)定測試,發(fā)貨前亦須通過檢測并提供質(zhì)檢報告,在市場上深受廣大客戶的贊許!

    4.貴公司有沒有酶活性檢測的試劑盒?

        酶活力的測定實際上就是測定酶促反應(yīng)的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來表示,單位是U/g或U/ml。酶活力的測定方法:⑴測定完成一定量反應(yīng)所需的時間,⑵測定單位時間內(nèi)酶催化化學(xué)反應(yīng)量。主要通過產(chǎn)物的增加量或底物的減少量來測定。常用的方法有:⑴分光光度法,⑵熒光法,⑶同位素測定法,⑷電化學(xué)法。

        ELISA的方法一般是對可溶性抗原或抗體進(jìn)行定性和定量的檢測,所以酶活性是不能用ELISA來檢測的。

    5.一次ELISA實驗需要多長時間?

        雙抗體夾心ELISA法一次實驗需要4-4.5小時,競爭ELISA法一次實驗需要2-2.5小時。

    6.血清樣本如何處理?

        全血標(biāo)本于室溫放置2小時或4℃過后于1000×g離心20分鐘。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。ELISA試劑盒

    7. 血漿樣本如何處理?

        應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,于1000×g離心15分鐘,仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

    8. 尿液樣本如何處理?

        用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

    9.細(xì)胞上清液樣本如何處理?

        檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

    10.   組織樣本如何處理?

        用預(yù)冷的PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織,以去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘,取上清檢測。ELISA試劑盒

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