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    在植物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,選擇好各項(xiàng)ELISA實(shí)驗(yàn)條件是很重要的

    點(diǎn)擊次數(shù):1032  更新時(shí)間:2022-11-22
      植物ELISA試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析檢測(cè)法可快速、準(zhǔn)確地測(cè)定植物。多種簡便、可靠、精準(zhǔn)、穩(wěn)定性好的生化檢測(cè)試劑盒和ELISA檢測(cè)試劑盒。
     
      在植物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,選擇好各項(xiàng)ELISA實(shí)驗(yàn)條件是很重要的,其中包括:
      (1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
     
     ?。?)包被抗體的選擇:將抗體吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。
     
     ?。?)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法”在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
     
    (4)酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。 
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